AROLAB -Laboratory of adventitious rooting and organogenesis

Instrumentación científica

Microscopio de hoja de luz Zeiss Lightsheet Z.1

La microscopía de fluorescencia de hoja de luz o LSFM (light sheet fluorescence microscopy) se basa en la iluminación selectiva de una parte de la muestra mediante una lámina de luz, lo que reduce en gran medida los daños infligidos a las muestras por los sistemas convencionales de iluminación. Esta técnica permite visualizar especímenes in vivo durante periodos prolongados de tiempo, muy superiores a los que son posibles mediante otros métodos (ej. microscopía confocal), con alteraciones mínimas en su estructura y en condiciones más próximas a las fisiológicas.

Aplicaciones:

  1.  Visualización de proteínas fluorescentes en tejidos vegetales intactos.
  2. Caracterización in vivo y durante periodos prolongados de tiempo de la              expresión de marcadores fluorescentes asociados a respuestas fisiológicas y/o de toxicidad.

Características del equipo:

  1.  Soporte portamuestras diseñado para sujetar el espécimen desde arriba con posibilidad de rotación de la muestra 360º para seleccionar la orientación más adecuada: Cubeta de un tamaño de 1x1x2 cm que permite acoplar muestras de un máximo de 22×12 mm de tamaño.
  2.  Dos objetivos de iluminación, 5x y 10x, que permiten trabajar a diferentes magnificaciones.
  3.  Tres objetivos de detección: W Plan-APO 10x/0.5, W Plan-APO 20x/1.0 y W Plan-APO 40x/1.0.
  4.  Tres láseres de estado sólido, de alta estabilidad y larga duración: 405 nm 20 Mw, 488 nm 30 Mw y 561 nm 20 mW.
  5.  Sistema de filtros para la detección de fluorescencia que permiten la visualización de marcadores fluorescentes como DAPI, GFP, YFP, RFP, Cy3, mCherry, PI o DsRED.
  6.  Cámara de incubación de la muestra con control independiente de temperatura mediante un sistema peltier de 10° C a 42° C en incrementos de 0.1° C.
  7.  Software arivis Vision4D x64,  para análisis y reconstrucción 3D de imágenes.
Normas de uso

Recomendamos encarecidamente a los usuarios interesados, la lectura del documento «Normas de uso_Microscopio Lightsheet Z.1», donde se detallan las normas de obligado cumplimiento sobre el uso del microscopio.

NORMAS DE USO_ MICROSCOPIO ZEISS LIGHTSHEET Z.1

Tutoriales

Con el fin de facilitar y optimizar el uso del microscopio Lightsheet Z.1, en esta sección ofrecemos a los usuarios una colección de vídeos donde se muestran los aspectos básicos de manipulación del equipo así como una guía rápida y detallada con la misma información.

La lista de reproducción titulada Formación Lightsheet Z.1 cuenta con el siguiente índice:

  1. Preparación de muestras.
  2. Montaje de muestras en el microscopio.
  3. Adquisión.
  4. Auto-ajuste del alineamiento del Lightsheet.
  5. Adquisición multidimensional Z-Stack.
  6. Adquisición Time-Series.
  7. Salvado de imágenes.
  8. Procesamiento de imágenes y visualización de ejemplos.


GUÍA RÁPIDA_LIGHTSHEET Z.1

Manuales

En esta sección ponemos a vuestra disposición manuales proporcionados por el equipo de Zeiss cuyo contenido, más extenso y especializado, permite profundizar en las aplicaciones que ofrece el microscopio Lightsheet Z.1.

SAMPLE PREPARATION_Lightsheet Z.1 Zeiss

ACQUISITION_Lightsheet Z.1 Zeiss

MULTIDIMENSIONAL ACQUISITION_Lightsheet Z.1 Zeiss

IMAGE PROCESSING_Lightsheet Z.1 Zeiss

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